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hFOB 1.19 人 SV40 轉染成骨細胞@新聞資訊

資料簡介

 hFOB 1.19 SV40 轉染成骨細胞

Catalogue No.: C022

Product Format: a T25 flask

Culture Properties貼壁

Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application: Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components

Item Specifications

a T25 flask 2X106

Manual 1 copy

Operation steps for cell culture

1. 吸走用于培養基,加入 3-5mL PBS 后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2. 吸干凈 PBS 后加入 1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表

面,培養瓶放 37 度培養箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或

者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止

消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3. 加入 6-8ml 完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4. 將混勻的細胞 1000rpm(約 150g)離心 3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸 37 度培

養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用

1:3-1:4 傳代,生長較慢的細胞可以 1:2 傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4 度 10min,-20 度 2h,-80 過夜后液氮保存。Instruction manual

Tips

1. 細胞經過運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰si亡破碎形成碎片,是正常現象。貼壁細胞

可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900-1000rpm(約 150g)離心 3min,棄上清。加 5ml

PBS 重懸細胞,再 900-1000rpm(約 150g)離心 3min,用新鮮的完全培養基重懸接種到新的培

養瓶。第二次 PBS 重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略 PBS 重懸的步

驟;如果碎片很多,建議 PBS 多洗幾次。

2. 細胞生長不均時,可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。

3. 細胞生長緩慢時,可以選擇提高血清濃度培養(zui高不超過 20%),也可以根據細胞生長狀態,

選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。

4. 不同細胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,20s-10min 均有可能,具體以細胞消化到

相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準,嚴禁消化到細胞完全漂浮。客戶消化過度導致細胞死

亡、漂浮、生長緩慢,不提供免費售后服務。

5. 干冰發貨均為兩支,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。

客戶同時復蘇兩支均狀態不佳,我方不提供免費售后服務

6. 細胞狀態正常時,應盡快凍存細胞保種,凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍

存細胞導致死亡負責,客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。

Notice

客戶收到細胞有任何疑問請及時致電我們,細胞收到后 1 周內沒有任何電hua,或其他形式回訪,

默認為細胞質量沒問題,之后出了任何問題不給予免費售后。細胞免費售后只提供一次,若重發后再

次培養死亡不再免費補發,細胞收貨時已經死亡或密度不足的除外。

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